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厭氧培養(yǎng)箱安裝與使用

更新時間:2018-07-16      點擊次數(shù):1475

厭氧培養(yǎng)箱安裝

  

  1.整機應安放在溫差較小、操作方便的位置,應避免陽光直曬和遠離采暖設備,放置平穩(wěn);

  

  2.將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn),并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當位置;

  

  3.接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合;

  

  厭氧培養(yǎng)箱使用

  

  (一)操作室厭氧環(huán)境形成:

  

  1.按使用要求放置好必要的附件和器具;

  

  2.通電源開照明燈,開溫控儀,調節(jié)所需溫度;

  

  3.操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示紙(封閉);

  

  4.關緊取樣室內外門,并抽真空校驗;

  

  5.操作室內次置換(氮氣置換):

  

  A.把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊

  

  B.接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥1,使手套鼓起,關閉閥門1,然后扎緊袋口;

  

  6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。如此連續(xù)三次氮氣置換。

  

  7.操作室第四次置換(混合氣體置換):

  

 ?。ɑ旌蠚怏w配比為N285%、H210%CO25%

  

  A.調換氣路打開混合氣閥3進氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關開閉排氣;

  

  B.關掉混合氣體閥3,并打開閥5,使混合氣體經(jīng)過流量計,調整流量計,流量為每分鐘10ml左右;

  

  C.混合氣體重復2-3次轉換,經(jīng)過上述過程,基本形成厭氧環(huán)境。

  

  8.操作室內打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后打開美蘭指示紙觀察其變況,不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境;

  

  9.開紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗自定。

  

 ?。ǘ┚N的置入和培養(yǎng):

  

  1.檢查取樣室內門并關緊;

  

  2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門;

  

  3.取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開氮氣閥2進氣,使指針回復零位,關掉閥2。第二次重復操作一次。第三次操作時,使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開閥4進混合氣,使指針回復零位,關掉閥

  

  4。取樣室充氮置換三次過程結束;

  

  4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);

  

  5.取樣室外門開啟、關緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗;

  

  6.厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:

  

  A.每天在操作室內打開美蘭指示紙觀察,如不正常就必須重新?lián)Q氣;

  

  B.要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補進的氮氣能和微量的氧結合通過催化吸收,保證室內厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;

  

  C.連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。

  

  D.操作室內溫度可任意選擇和控制。

  

  7.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整:調節(jié)減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。

厭氧培養(yǎng)箱使用步驟

  厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境下進行細菌培養(yǎng)及操作的裝置,可培養(yǎng)難生長的厭氧升物,又能避免以往厭氧生物在大氣操作時接觸氧氣而死亡的危險 。廣泛應用于醫(yī)學、免疫學、遺傳學、微生物、農業(yè)科學、藥物學的研究和生產,已經(jīng)成為上述領域實驗室常用的儀器。我們在使用如何正確規(guī)范的操作厭氧培養(yǎng)箱呢,下面就做簡單介紹

一、操作形成厭氧環(huán)境

  1、按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內放入二個無毒塑料袋。 
  2、通電源開照明燈,開控溫儀,調節(jié)所需溫度及安全溫度。
  3、操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。 
  4、 關緊取樣室內外門,并抽真空校驗。
  5、操作室內次置換(氮氣置換): 
 ?。?/span>1)先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一頭插入塑料袋。
  (2)接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,然后扎緊袋口。 
  (3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
  (4)把塑料袋內氮氣漸漸地放于操作室內,至全部放出。 
  6、操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
  7、操作室第三次置換(混合氣體置換): 
 ?。ɑ旌蠚怏w配比為:N2 85%H2 10%;CO2 5%)。
 ?。?/span>1)調換氣路打開混合氣道通閥門進氣,充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣。 
 ?。?/span>2)混合氣充滿塑料袋后,關掉混合氣直通閥(三通閥),使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。 
  (3)把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。 
  (4)通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
  8、操作室內打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變況,不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境。 
  9、開紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理。滅菌時間自定。 

二、菌種的置入和培養(yǎng)

  1、檢查取樣室內門并關緊之。 
  2、打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門。
  3 取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復零位后進行下次操作。 
  4、如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
  5、取樣室內外門開啟,關緊要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)檢驗及幫助操作。 
  6、厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:
 ?。?/span>1)每天在操作室內打開美蘭指示劑觀察,正常情況下使用。如不正常就必須重新?lián)Q氣。 
  (2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補進的氫氣能和微量的氧結合通過催化吸收,保證了室內厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。 
  (3)連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。 
  7、接種棒滅菌器的應用:
 ?。?/span>1)隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。 
 ?。?/span>2)熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉熔蠟。
  8、操作室里的培養(yǎng)箱內的溫度不可任意選擇和控制。 
  9、調整混氮氣瓶、合氣瓶輸出壓力:調節(jié)減壓閥,使輸出壓力為0.1Mpa左右。 

 

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